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關于ELISA顯色的異常問題,經常有客戶咨詢提問,下面舉例一個實驗中客戶常問到的技術問題。
問:實驗結果除了空白對照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?
技術答復可能原因如下:
(1) 水質被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應注滿微孔,充分洗滌。
(3) 移液頭重復使用,未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
(4) 酶標板靈敏度過高。
(5) 一抗顯色時間的控制等等,關于ELISA的每一步都要注意才行。