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本來ELISA試劑盒的原理及辦法是較為簡略的,有關ELISA操作的材料,網上一大堆,可是真正到自個上手的時分仍是會犯模糊。今日咱們就來細心說說這方面的疑問,我司技能解析:試驗菜鳥怎么靈活運用ELISA試劑盒?
1.關于一些小分子的查看,通常來說,要用競爭法ELISA去查看,也要采購選用這個辦法的盒子。通常細胞因子的查看,都是選用常規的夾心法ELISA查看,由于因子分子量比較大,通常10幾個KD擺布,很簡略找到兩個或許多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不一樣的表位,也就決定了包被抗體和查看抗體無法一起小分子并固相化。解決方案即是酶標板上包被二抗,每個孔參加一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶符號的查看抗體,顯色底物。樣品的意圖小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個疑問,這是不是客戶的誤區,即是拿來一個目標就想當然地嘗試用ELISA去查看。ELISA查看辦法簡略,靈敏度高,可是該查看活性的查看活性,該做western的做western。
特別闡明
① ELISA試劑盒標準有96T和48T兩種,翻開包裝后要及時查看一切物品是不是*完好。
② 一星期內運用可存于4℃,需長時間寄存或屢次運用主張存于-20℃。
操作提醒:
① 將液體加到酶標孔中時,防止槍頭和孔內液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孔壁觸摸,液滴會天然流下去。
② 液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
③ 溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸騰。
④ 洗液不行時,可用蒸餾水自行制造PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,參加0.1%的吐溫6作為洗液。參加1/1000的疊氮鈉后可長時間保留。
⑤ ELISA試劑盒洗板時,每次洗液參加后,應靜置1分鐘,使清潔愈加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。