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ELISA酶聯試劑盒基本原理是什么呢?
ELISA(酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫試劑盒)基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合,此種結合不會改變抗體的免疫學特性,也不會影響酶的生物學活性。
此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型,出現顏色反應。
因此,可通過底物的顏色反應來判定有無相應的免疫反應,顏色反應的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。
此種顯色反應可通過ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)檢測儀進行定量測定,這樣就將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來,使ELISA(酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。
一個完整的ELISA試劑盒都是有以下部分完整組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及標本的稀釋液;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
以上內容就是ELISA酶聯試劑盒基本原理了。