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實驗動物免疫方案 1、抗原: 蛋白質、多肽、細胞器、細胞、組織等。 2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。 3、不同動物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例) >18-20kDa <18-20kDa 動物 抗原量 *抗原量 抗原量 *抗原量 兔子 20-200 100 50-400 200 小鼠 2-40 15 4-60 40 大鼠 10-50 30 20-150 50 綿羊 100-1000 200 200-1000 400 母雞 20-200 100 50-400 200 單位:微克 4、免疫方案(以免疫兔子為例): 天數 0 14 28 38 56 66 87 注射 x x x x 采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml 5、注意: 1)*次免疫用*佐劑與免疫原混合,以后加強免疫用不*佐劑與免疫原混合,采取多點,時間間隔式免疫法。 2) 如果用細胞免疫兔子,那么每次免疫所需細胞量為2-3 x 107 cells。 3) 在連續免疫完三次后,需要少量取血進行ELISA檢測,檢測所免疫動物的抗體滴度,一般滴度能達到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動物前一周應加強一次免疫。 4) 如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約50µl),zui后取眼球大量采血(大約500-1000µl);如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約2mL),zui后心臟大量取血(50-100mL) 5) 按血清制備的標準方法將血清分離,并且分裝成小份,儲藏在-80oC。