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ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入熱休克蛋白,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的熱休克蛋白呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中熱休克蛋白濃度。
ELISA試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月