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在使用操作ELISA試劑盒時,檢測樣品的因素是實驗重點之一。根據(jù)上海恒遠技術(shù)員的研究與發(fā)現(xiàn),原來ELISA試劑盒的樣品稀釋還有這等講究……我們以血清樣品為例,酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會產(chǎn)生很強的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。
因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗確定,ELISA試劑盒以保證試驗的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴格按使用說明書操作,如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進行稀釋,個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確,檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。