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影響ELISA試劑盒中非特異性顯色的緣由許多,如試劑盒特異性、查驗標本中含酶符號物的煩擾物,操作進程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡明剖析,以便能夠經過以上辦法把非特異顯色降至zui低極限,然后行進檢測的特異性,并得到更、牢靠的試驗作用。
查驗標本中富含酶符號物的煩擾物
內源性煩擾物:類風濕因子(RF)、黃疸等,類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的本身抗體,大都為IgM類,能充任抗原成分與固相及酶標抗體反響,然后出現非特異性顯色。
黃疸血標本中常富含內源性過氧化物酶,如用辣根過氧化物酶為符號物,就有能夠發作非特異性顯色。
外源性煩擾物,常常因樣品收集、儲存、處置不妥構成如樣品溶血,被細菌污染,標本凝聚不全等。溶血標本,紅細胞溶解割裂,釋放出血紅素構成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本能夠會添加非特異性顯色。如有細菌污染,菌體中能夠富含內源性HRP,有國內報導酶免HAg試劑檢測溶血標本時可構成假陽性。如在冰箱中保管過久,其間的IgG可發作聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而,血標本在收集處置時應留心,在冰箱中保管不易過久。